Nutrición y Genómica de Plantas · UACh
¡Nuestro primer laboratorio práctico de Biología Molecular Vegetal después de la pandemia! Un excelente comienzo con estudiantes de tercer año de Bioquímica de la Universidad Austral de Chile: extracción de RNA de alta calidad a partir de hojas de trigo.
Our first Plant Molecular laboratory after pandemic¡¡¡¡¡. Excellent start with third-year biochemistry students at Universidad Austral de Chile, extraction of high quality RNA from wheat leaves.
Para detectar de forma rápida y económica las plantas de trigo transformadas que contienen la mutación generada por CRISPR en nuestro gen favorito, en el NGPlab identificamos sitios de enzimas de restricción que se pierden debido a la mutación. Así, si la maquinaria CRISPR-Cas9 logró generar la mutación en nuestro gen de interés, en un gel de agarosa se verá solo «1 banda», que no puede ser digerida por las enzimas de restricción y corresponderá a una planta mutante. Esto es lo opuesto a lo que se observa en las plantas silvestres, donde aparecen «dos bandas» generadas por el corte de la enzima. De esta forma, verificamos por secuenciación directa solo los posibles mutantes y optimizamos los recursos del laboratorio.
To quickly and inexpensively detect wheat transformant plants that contain the mutation in our favorite gene generated by CRISPR, in NGPlab, we have identified restriction enzyme sites lost due to the mutation. So, if the CRISPR-Cas9 machinery managed to generate the mutation in our gene of interest, only «1 band» will be seen in an agarose gel, which cannot be digested by the restriction enzymes and will correspond to a mutant plant!!!!. This is opposite to what is observed in wild-type plants, where you will see the presence of «two bands» generated by the enzyme cutting. This way, we verify only the possible mutants by direct sequencing and optimize the lab’s resources.
Esta semana estuvimos ocupados discutiendo proyectos nuevos e interesantes, pero también disfrutando juntos de las Fiestas Patrias.
This week we have been busy discussing new and interesting projects, but also enjoying the national holidays together.
Estamos muy felices con las nuevas instalaciones del NGPlab en el Instituto de Bioquímica y Microbiología (Valdivia, Chile). Muy agradecidos de la Universidad Austral de Chile.
We are very excited about the new NGPlab facilities at the Institute of Biochemistry and Microbiology (Valdivia, Chile). Very grateful to the Universidad Austral de Chile
